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cck如何进行cck8试剂的检测步骤
点击次数:529 发布时间:2018-04-16
对于cck8试剂如何进行检测,小编发现有许多用户都不知道如何进行,那今天呢小编就此问题以文章的形式给大家讲一讲cck8试剂的检测步骤吧
cck8试剂检测步骤
1. 向各孔中加入100 μl细胞悬液。a) 2. 在37℃下预孵育培养板。b)
3. 向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10 μl。 4. 37℃下孵育。
5. 向各孔中加入10 μl的cck8试剂溶液d)。 6. 37℃下孵育1-4小时。e) 7. 测定450 nm处的OD值。
a) 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。 b) 建议使用CO2培养箱过夜预培养。 c) 使用培养基或PBS来制备溶液。
d) 如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有cck8试剂的待测溶液在450 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入cck8试剂 ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100 μl培养基和10 μl cck8试剂进行检测。 e) 白细胞可能需要培养较长时间。
活力计算
细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100 A(加药):具有细胞、cck8试剂溶液和药物溶液的孔的吸光度 A(空白):具有培养基和cck8试剂溶液而没有细胞的孔的吸光度 A(0加药):具有细胞、cck8试剂溶液而没有药物溶液的孔的吸光度 *细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
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